特殊顯微鏡的介紹和應(yīng)用

特殊顯微鏡的介紹和應(yīng)用

大家常用的一種一些顯微鏡，比如：生物顯微鏡、體視顯微鏡、金相顯微鏡等，但一些特殊材質(zhì)必須一些特殊顯微鏡，今天就由上海巴拓儀器有限公司介紹一些比較特殊的顯微鏡及相關(guān)技術(shù)。

1．熒光顯微鏡（fluorescence microscope）就是用來觀查樣本里的自發(fā)性熒光物質(zhì)或者以熒光素上色或標(biāo)識的細胞材料結(jié)構(gòu)。

熒光顯微鏡要以高壓鈉燈所產(chǎn)生的短波紫外線為燈源，并配以激起、阻隔、吸熱反應(yīng)和吸收紫外線等過濾芯系統(tǒng)軟件，樣本里的熒光物質(zhì)在紫外光激起下產(chǎn)生各種顏色熒光，進而科學(xué)研究該熒光物質(zhì)在細胞和組織內(nèi)的遍布。

組織內(nèi)部的自發(fā)熒光物 質(zhì)如神經(jīng)系統(tǒng)細胞和心臟細胞等里的脂褐素呈深黃色熒光，肝貯脂細胞和視網(wǎng)膜色素上皮細胞里的維他命A呈綠色熒光，一些神經(jīng)內(nèi)分泌細胞和交感神經(jīng)里的單丙烯胺物質(zhì)（兒茶酚、5－5羥色胺、組織胺等）在室內(nèi)甲醛影響下呈不同顏色熒光，機構(gòu)中含有的奎寧、四環(huán)素類藥物也呈現(xiàn)出一定的熒光。

細胞里的某些成分能與熒光素融合而顯熒光，如溴化乙錠與吖啶橙能與DNA綜合性，開展細胞內(nèi)DNA含量測定。熒光顯微鏡更廣泛運用于免疫力細胞化學(xué)研究，就是以異硫氰酸或羅丹明等熒光素標(biāo)識抗原（一抗或二抗），用此標(biāo)識抗原直接或間接地與細胞里的相對應(yīng)抗原體融合，以檢測該抗體的存在與遍布。

2．相差顯微鏡（phase contrast microscope）也叫相襯顯微鏡，主要是用于觀查組織培養(yǎng)技術(shù)中活細胞形態(tài)特征的。活細胞透明顏色，一般電鏡下不容易辨別細胞輪廊以及構(gòu)造。

相距顯微鏡的特點就是將活細胞不一樣厚 度及細胞內(nèi)各種各樣構(gòu)造對光線所產(chǎn)生的不一樣映射功效，轉(zhuǎn)換成光密度差別（明暗度差），使鏡下觀構(gòu)造差距顯著，影象清晰。組織培養(yǎng)技術(shù)科學(xué)研究常見的是顛倒相距顯微鏡（inverted phase contrast microscope），它光源和聚光器在測角儀上方，目鏡在測角儀下方，有利于觀查粘貼在訓(xùn)練容器底壁上的活細胞。

3．暗視野顯微鏡（dark-field microscope）也叫暗場顯微鏡，主要運用于觀查因差距或分辨率不夠的微小顆粒。此類顯微鏡主要有一個暗視野集光器，使光源不直接進物境，故呈暗視野。而樣本里的 顆粒所產(chǎn)生的衍射光或漫射光進到目鏡，暗視野里的顆粒物呈光亮小一點，如同在暗房由此可見一束光線里的細微細顆粒物一般。

一般光學(xué)鏡最高分辨率為0.2μm，暗視野顯微鏡則可以辨別0.004～0.2μm的顆粒，適用觀查細胞內(nèi)膜蛋白運動及樣本中細菌粒子的活動等。

4．共集激光測量顯微鏡（confocal laser scanning microscope,CLSM）是最近10年研發(fā)成的高光敏感度、高分辨率的新式儀器設(shè)備。它是以激光器為燈源，光線經(jīng)瞄準(zhǔn)后落到試品（機構(gòu)薄片或細胞）不一樣深入的 細微一點，并且做好挪動掃描儀，根據(jù)電子信號五顏六色成像，通過微型機圖像檢測系統(tǒng)實現(xiàn)二維和三維分析處理。

CLSM可以對細胞開展三維結(jié)構(gòu)圖像檢測，細胞內(nèi)各種各樣熒光標(biāo)識 物痕量元素，細胞內(nèi)Ca2 、pH值等動態(tài)變化測量，細胞的蛋白激酶挪動、膜電位轉(zhuǎn)變、酶促反應(yīng)和物質(zhì)裝運的測量，并且以激光器對細胞以及性染色體進行加工、分離出來、篩選與復(fù)制。

因而，CLSM是一種高技術(shù)產(chǎn)品，可以對細胞的各種功能開展自動式、高效率、快速地少量定性與定量測量。

其他如偏光鏡顯微鏡用于研究機構(gòu)結(jié)晶物質(zhì)及化學(xué)纖維等光學(xué)特性，紫外線顯微鏡用于研究細胞內(nèi)核苷酸的分布與定量分析等。